無外泌體血清的制備步驟及注意事項

更新時間：2021-08-11　點(diǎn)擊量：2616

　　無外泌體血清是一種可由多種細(xì)胞分泌的直徑為30-150nm的膜性小囊泡。經(jīng)研究后發(fā)現(xiàn)，其內(nèi)含有*的蛋白質(zhì)與核酸分子，所含成份與其細(xì)胞來源密切相關(guān)，這也決定了無外泌體血清的功能特異性，如抗原提呈、信號傳導(dǎo)或誘導(dǎo)抗腫瘤免疫反應(yīng)、細(xì)胞遷移、細(xì)胞分化、細(xì)胞間通信、腫瘤轉(zhuǎn)移等。目前，無外泌體血清研究已經(jīng)成為臨床診斷與基礎(chǔ)醫(yī)生的新熱點(diǎn)。

　　無外泌體血清制備步驟：

　　1. 根據(jù)需要處理的血清體積選擇合適的轉(zhuǎn)子與超離管。

　　2. 在超凈工作臺，將普通血清置于超離管中，配平后，進(jìn)行熱封口。

　　3. 將封口后的超離管放于離心機(jī)轉(zhuǎn)子中，并加入相應(yīng)適配器然后擰緊轉(zhuǎn)頭蓋。

　　4. 設(shè)置離心程序：4℃，120,000 ×g，離心18小時（也有研究者選擇100,000 ×g離心18小時）。

　　5. 離心結(jié)束后，回收上清液，為避免污染，在超凈工作臺操作。

　　6. 收集得到無外泌體血清，并儲存于-20℃中備用。

　　注意事項請注意了：

　　1：離心后，血清外泌體會富集在管底和管壁；

　　2：吸取血清時，只吸取澄清部分的血清，并且遠(yuǎn)離上圖中標(biāo)記的區(qū)域；

　　3：吸取70-80%的澄清的血清；（注意：動作慢，動作輕）

　　4：其余的渾濁血清留作正常細(xì)胞的的營養(yǎng)物添加使用，避免浪費(fèi)。